Koks yra pirminio antikūno tikslas Western blot?
Koks yra pirminio antikūno tikslas Western blot?

Video: Koks yra pirminio antikūno tikslas Western blot?

Video: Koks yra pirminio antikūno tikslas Western blot?
Video: Вестерн-блоттинг - теория и метод 2024, Liepa
Anonim

Taikant tiesioginio aptikimo metodą, konjuguojamas fermentas arba fluoroforas pirminis antikūnas naudojamas aptikti dominantį antigeną dėmė . Taikant netiesioginį aptikimo metodą, nepažymėtas pirminis antikūnas pirmiausia naudojamas prisijungti prie antigeno.

Be to, kas yra pirminis antikūnas Western blot?

The pirminis antikūnas atpažįsta ir suriša dominančio baltymo epitopą arba specifinę aminorūgščių seką. Antrinis antikūnai naudojama Western blotting paprastai yra konjuguoti su fermentu; dažniausiai naudojami fermentai yra krienų ridikėlių peroksidazė (HRP) ir šarminė fosfatazė (AP).

Be to, ką veikia pirminis antikūnas? Pirminiai antikūnai yra imunoglobulinai, kurie jungiasi prie specifinio antigeno ( baltymas , peptidas, maža molekulė ir kt.) ir paprastai yra nekonjuguoti. Geras pirminis antikūnas atpažįsta ir suriša didelį afinitetą ir specifiškumą, kad išgrynintų, aptiktų ir išmatuotų antigeną.

Taigi, koks yra „Western blot“tikslas?

A western blot yra laboratorinis metodas, naudojamas aptikti specifines baltymų molekules iš baltymų mišinio. Toliau baltymų molekulės atskiriamos pagal jų dydį, naudojant metodą, vadinamą gelio elektroforeze. Po atskyrimo baltymai iš gelio perkeliami į dėmėjimas membrana.

Kaip antikūnai naudojami Western blotting?

Antikūnai yra naudojamas aptikti tikslinius baltymus ant western blot (imunoblotas). The antikūnai yra konjuguotos su fluorescencinėmis ar radioaktyviosiomis etiketėmis arba fermentais, kurie vėliau reaguoja su panaudotu reagentu, dėl kurio atsiranda spalva arba skleidžiama šviesa, leidžianti aptikti.

Rekomenduojamas: